ਪੀਸੀਆਰ, ਜਾਂ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ, ਇੱਕ ਤਕਨੀਕ ਹੈ ਜੋ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਪਹਿਲੀ ਵਾਰ 1980 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਵਿੱਚ ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਸਨੂੰ ਉਸਦੇ ਕੰਮ ਲਈ 1993 ਵਿੱਚ ਕੈਮਿਸਟਰੀ ਵਿੱਚ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਪੀਸੀਆਰ ਨੇ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਾਂਤੀ ਲਿਆ ਦਿੱਤੀ ਹੈ, ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਛੋਟੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਅਤੇ ਇਸਦਾ ਵਿਸਥਾਰ ਵਿੱਚ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਇੱਕ ਤਿੰਨ-ਪੜਾਵੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ ਜੋ ਇੱਕ ਥਰਮਲ ਸਾਈਕਲਰ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇੱਕ ਮਸ਼ੀਨ ਜੋ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਬਦਲ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਤਿੰਨ ਪੜਾਅ ਹਨ ਵਿਕਾਰ, ਐਨੀਲਿੰਗ, ਅਤੇ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ।
ਪਹਿਲੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ, ਵਿਨਾਸ਼ਕਾਰੀ, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਹਾਈਡਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਨੂੰ ਤੋੜਨ ਲਈ ਇੱਕ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ (ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਲਗਭਗ 95 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ) ਤੱਕ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਦੋ ਤਾਰਾਂ ਨੂੰ ਇਕੱਠੇ ਰੱਖਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਦੋ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਅਣੂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਦੂਜੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ, ਐਨੀਲਿੰਗ, ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 55 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੱਕ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਉੱਤੇ ਪੂਰਕ ਕ੍ਰਮਾਂ ਨੂੰ ਐਨੀਲ ਕਰਨ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੱਤੀ ਜਾ ਸਕੇ।ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਟੀਚੇ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਉੱਤੇ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਨਾਲ ਮੇਲ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।
ਤੀਜੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ, ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ, ਟੈਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ (ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਇੱਕ ਕਿਸਮ) ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਤੋਂ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਇੱਕ ਨਵੇਂ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਨੂੰ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦੇਣ ਲਈ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 72 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੱਕ ਵਧਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਇੱਕ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ ਜੋ ਗਰਮ ਚਸ਼ਮੇ ਵਿੱਚ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨਾਂ ਦਾ ਸਾਮ੍ਹਣਾ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਇੱਕ ਚੱਕਰ ਦੇ ਬਾਅਦ, ਨਤੀਜਾ ਟੀਚਾ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਦੀਆਂ ਦੋ ਕਾਪੀਆਂ ਹਨ।ਕਈ ਚੱਕਰਾਂ (ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 30-40) ਲਈ ਤਿੰਨ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ ਦੁਹਰਾਉਣ ਨਾਲ, ਟੀਚੇ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਦੀਆਂ ਕਾਪੀਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸਦਾ ਮਤਲਬ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਇੱਕ ਛੋਟੀ ਜਿਹੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਵੀ ਲੱਖਾਂ ਜਾਂ ਅਰਬਾਂ ਕਾਪੀਆਂ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਕੋਲ ਖੋਜ ਅਤੇ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕਸ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਸਾਰੀਆਂ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਹਨ।ਇਹ ਜੈਨੇਟਿਕਸ ਵਿੱਚ ਜੀਨਾਂ ਅਤੇ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦੇ ਕੰਮ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ, ਡੀਐਨਏ ਸਬੂਤਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਫੋਰੈਂਸਿਕ ਵਿੱਚ, ਜਰਾਸੀਮ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਛੂਤ ਵਾਲੀ ਬਿਮਾਰੀ ਦੇ ਨਿਦਾਨ ਵਿੱਚ, ਅਤੇ ਗਰੱਭਸਥ ਸ਼ੀਸ਼ੂ ਵਿੱਚ ਜੈਨੇਟਿਕ ਵਿਗਾੜਾਂ ਲਈ ਸਕ੍ਰੀਨ ਕਰਨ ਲਈ ਜਨਮ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦੇ ਨਿਦਾਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਕਈ ਭਿੰਨਤਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ ਲਈ ਵੀ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ (qPCR), ਜੋ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪੀਸੀਆਰ (RT-PCR) ਨੂੰ ਉਲਟਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਇਸਦੀਆਂ ਬਹੁਤ ਸਾਰੀਆਂ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਦੇ ਬਾਵਜੂਦ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੀਆਂ ਸੀਮਾਵਾਂ ਹਨ।ਇਸ ਨੂੰ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਢੁਕਵੇਂ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਦੇ ਗਿਆਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਜੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਇਹ ਗਲਤੀ ਦਾ ਸ਼ਿਕਾਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਅਤੇ ਐਗਜ਼ੀਕਿਊਸ਼ਨ ਦੇ ਨਾਲ, ਪੀਸੀਆਰ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ਸਾਧਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਬਣਿਆ ਹੋਇਆ ਹੈ।
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਫਰਵਰੀ-22-2023